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      Vero細胞系特性和應用

      更新時(shí)間:2024-04-09      點(diǎn)擊次數:261

      Vero細胞系是一種源自非洲綠猴腎上皮細胞的永生化哺乳動(dòng)物細胞模型,站在病毒學(xué)、微生物學(xué)以及細胞和分子生物學(xué)研究的前沿。它們的廣泛應用涵蓋疫苗開(kāi)發(fā)、藥物篩選以及病毒和寄生蟲(chóng)生物學(xué)、腫瘤免疫學(xué)和免疫治療策略的探索。

      Vero細胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲綠猴的腎上皮細胞。

      Vero細胞克隆及其性質(zhì)

      來(lái)自Vero細胞系的不同克隆顯示出區別于原始細胞系的特征。其中,兩個(gè)著(zhù)名的Vero細胞克隆是:

      • Vero E6細胞系:該克隆也稱(chēng)為Vero C1008,來(lái)自Vero 76細胞,1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀釋技術(shù)分離。Vero E6細胞特別適合培養復制緩慢的病毒。

      • Vero 76細胞:這些細胞起源于1968年的一只非洲綠猴的腎臟,保持了Vero細胞的上皮形態(tài)特征。

      這些Vero細胞變體與親代細胞系一起,繼續有助于推進(jìn)病毒學(xué)研究和醫學(xué)干預措施的發(fā)展,標志著(zhù)它們在科學(xué)界的重要性。

      培養猴細胞系Vero細胞需要熟悉特定的參數,如倍增時(shí)間、接種密度和合適的生長(cháng)培養基。

      • 人口倍增時(shí)間:Vero細胞的倍增時(shí)間約為24小時(shí)。

      • 堅持性:Vero細胞粘附在表面上,培養時(shí)通常形成單層。

      • 播種密度:建議從1倍10^4 cells/cm^2.的播種密度開(kāi)始為了培養粘附的Vero細胞,用PBS清洗它們并用Accutase處理它們以分離它們。分離后,離心細胞,將其重新懸浮在新鮮培養基中,并將其轉移到新的培養瓶中。

      • 生長(cháng)培養基:哈姆的F12和DMEM都是培養Vero細胞的合適培養基。這些應補充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清(FBS)以支持最佳生長(cháng)。培養基應該每周更新兩到三次。

      • 生長(cháng)條件:Vero細胞在37°C的溫度和5% CO2的潮濕環(huán)境中生長(cháng)旺盛。

      • 存儲:對于長(cháng)期儲存,Vero電池應保持在低于-150°C的溫度下,要么放在超低溫冰箱中,要么放在液氮的蒸汽相中。

      • 冷凍過(guò)程和介質(zhì):對于冷凍保存,使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生長(cháng)培養基作為冷凍培養基。采用緩慢冷凍技術(shù),每分鐘逐漸降低1°C的溫度。

      • 解凍過(guò)程:將容器浸入37°C水浴中并輕輕攪動(dòng)40-60秒,解凍Vero細胞。然后,在新鮮培養基中稀釋細胞,離心去除冷凍保護劑,重新懸浮在新鮮生長(cháng)培養基中,并將其置于新的燒瓶中以恢復和生長(cháng)。

      • 生物安全等級:Vero細胞應在符合1級生物安全要求的實(shí)驗室中處理。

      Vero細胞系在研究中的應用

      Vero細胞系在細胞生物學(xué)和病毒學(xué)領(lǐng)域有許多研究應用。在這里,我們討論了一些具體的問(wèn)題。


      病毒研究和疫苗生產(chǎn)中的Vero細胞

      源自非洲綠猴腎細胞的Vero細胞已成為多種病毒疫苗生物過(guò)程開(kāi)發(fā)中的主要成分,包括脊髓灰質(zhì)炎病毒和日本腦炎病毒。它們在貼壁和懸浮培養中的適應性及其廣泛的病毒支持能力,包括對小反芻獸疫病毒等病原體的支持能力,突出了它們在病毒分離和疫苗開(kāi)發(fā)中的重要性。

      許多研究利用Vero細胞生產(chǎn)人類(lèi)疫苗。例如,2019年發(fā)表的一項引人注目的研究證明了在黃熱病病毒滅活疫苗的開(kāi)發(fā)中使用Vero細胞【2】。

      Vero細胞通常用于病毒感染研究。

      Vero細胞在組織工程和上游生物過(guò)程開(kāi)發(fā)中的作用

      除了疫苗生產(chǎn),Vero細胞還有助于組織工程和更廣泛的生物過(guò)程開(kāi)發(fā)領(lǐng)域,這強調了對其特性和應用進(jìn)行持續研究的必要性。選擇合適的Vero細胞亞系是最大限度地發(fā)揮其在生物技術(shù)和制藥工業(yè)中的潛力的關(guān)鍵。

      Vero細胞在藥物療效和安全性測試中的應用

      Vero細胞經(jīng)常用于藥物測試,以評估藥物化合物的有效性和安全性。在研究各種藥物和治療劑的細胞毒性作用時(shí),這些細胞通常被認為是正常腎細胞的標準模型。例如,研究比較了白骨壤植物根提取物對肝癌細胞系HepG2和猴腎上皮細胞Vero細胞的影響,發(fā)現提取物對癌細胞的損害比對正常細胞的損害更大。

      Vero細胞的局限性

      盡管vero細胞被廣泛使用,但它們也有其局限性,例如Vero毒素的產(chǎn)生和基因組的改變可能會(huì )影響某些應用。了解Vero細胞(包括Vero譜系F6)的特定亞系和基因組特征對于優(yōu)化其在各種生物過(guò)程中的應用至關(guān)重要。


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