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                關于細胞分離試劑盒

                更新時間:2023-12-22      點擊次數:204

                過研究體內組織來源的細胞,可以對細胞的生物學和功能進行有效的預測,但這需要對靶標細胞群體進行分離,否則生物學的復雜性可能導致結果混淆。為了對細胞表型進行研究,目前已開發出多種基于明確特征對細胞群體進行分離的不同方法。對細胞群體進行分離不僅有助于生物學研究,而且也能促進臨床上的診斷性檢測。有效的分離方法應具備出色的產量、純度和活力??赏ㄟ^正向選擇(通常采用結合細胞特異性標志物的抗體)或負向選擇(基于生物物理特性將不需要的細胞進行去除從而富集靶標細胞群體)來實現對靶標細胞群體的富集或純化。

                長期以來,將細胞分離成各種亞細胞成分一直都是細胞生物學研究的基礎。亞細胞分離技術已廣泛用于研究細胞器和亞細胞區室的結構和功能,以及了解生物分子的定位、加工和運輸。大多數分離技術都旨在獲得處于功能性狀態的細胞器和細胞大分子,此時它們仍保留其固有的生化特性。這通常通過采用溫和的機械方法或使用溫和的去污劑進行細胞裂解,然后通過差異離心將細胞成分進行分離來實現。

                基于表型的細胞分離

                為了評估脂質裂解、細胞信號轉導、內分泌功能和代謝活性,可以使用前脂肪細胞來研究脂肪形成和分化后的過程。

                我們的前脂肪細胞分離試劑盒包含了從脂肪組織中分離基質血管細胞成分所需的工具和試劑。所得到的基質血管成分將會培養在前脂肪細胞所粘附的組織培養板上。前脂肪細胞保留了增殖以及在使用誘導分化成分處理時可分化為脂肪細胞的能力。

                細胞器和亞細胞復合物的分離

                亞細胞成分的衍生可促進對細胞器功能的理解,并催生新的生物技術。例如,從哺乳動物細胞中分離出的細胞核可后續用于合成內源性RNA初級轉錄本。我們已開發出了高產量的Nuclei EZ Prep試劑盒,可快速分離出大多數哺乳動物的細胞核。

                為了檢測線粒體的完整性和膜電位,我們的線粒體染色試劑盒使用了JC-1染料,其會集中在線粒體基質中并形成紅色熒光團。細胞凋亡等能夠消耗線粒體膜電位的事件會阻止JC-1染料在線粒體中的積累,因此可利用熒光顯微鏡來區分具有活力的線粒體和受損的線粒體。

                另外,也可分離非細胞器的亞細胞復合物(如蛋白酶體),將其用于蛋白水解測定。我們使用含有一段GST融合蛋白的親和基質微珠進行分離,該融合蛋白具有可與GST-瓊脂糖結合的泛素樣結構域。

                細胞骨架富集

                傳統上,研究與肌動蛋白細胞骨架相關的蛋白都很棘手,因為細胞骨架元素不溶于類似于Triton X-100的去污劑。Millipore ProteoExtract細胞骨架富集和分離試劑盒帶有細胞骨架純化緩沖液,能夠保留粘著斑和肌動蛋白相關蛋白并同時從細胞中去除可溶性細胞質和核蛋白。該方法可增強檢測并研究低豐度肌動蛋白相關蛋白的能力,而這些蛋白在使用Western blotting分析全細胞裂解物時通常會被掩蓋掉。



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