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      肽的重構、??溶解度和儲存

      更新時(shí)間:2023-12-22      點(diǎn)擊次數:286
      為了確保我們的材料保持其完整性,建議遵循以下存儲和使用指南。一般來(lái)說(shuō),我們不必將肽溶解在水性緩沖液中以進(jìn)行質(zhì)量控制。我們的建議基于經(jīng)驗和肽序列。  

      最規則和帶電的肽  

      要確定溶解肽的合適方法,請僅使用少量合適的溶劑。將肽溶解在蒸餾水或去離子無(wú)菌水中(如果可能,無(wú)氧)。只有當肽溶解后,才應添加所需的緩沖鹽/溶液,并將溶液稀釋至最終濃度,即先溶解肽,然后添加緩沖液。 
      肽溶液中可能發(fā)生細菌降解。 

      始終使用無(wú)菌水溶解肽。 

      如果需要,可以通過(guò) 0.45 um 或 0.2 um 過(guò)濾器過(guò)濾肽溶液。不要將肽溶液保存在室溫下。 
      半胱氨酸、蛋氨酸或色氨酸等氨基酸容易氧化,應溶解并儲存在無(wú)氧水中。這可以通過(guò)在減壓下通過(guò)保留惰性氣體如氮氣、氦氣或氬氣進(jìn)行脫氣來(lái)制備。 
      如果肽不溶于純水,超聲處理可能有助于分解任何顆粒并提高溶解速度。
      注意:超聲處理會(huì )導致溶液升溫和肽降解。  

      對于高堿性肽 

      如果肽含有許多堿性氨基酸(K、R 等),請使用乙酸水溶液(1 至 10%),并進(jìn)行或不進(jìn)行超聲處理。對于疏水性很強的肽,請使用 50% 乙酸水溶液。 

      對于高酸性肽  

      如果肽含有許多酸性氨基酸(E、D 等),請使用氨水溶液(1 至 10%)或揮發(fā)性堿性緩沖液(pH 高達 8),例如 N-乙基嗎啉乙酸鹽或碳酸氫鹽,并進(jìn)行或不進(jìn)行超聲處理。色譜分析前可能需要調整 pH 值。 
      丙醇或乙腈可用于溶解一些中等大小的肽。如果要將肽注射到柱上,有機溶劑尤其是丙醇的用量必須保持少量,否則保留時(shí)間將受到很大影響。  
       

      對于高疏水性肽  

      如果肽具有高度疏水性,具有芳香族或烴類(lèi)側鏈,例如 Val、Leu、Ile、Met、Phe、Try、Ala,或者如果肽是中性,則使用離液劑,例如 DMF/D">
      a。高濃度離液鹽可通過(guò)破壞二級結構來(lái)幫助溶解肽。 
      b.離液劑適合制備用于分析的溶液,但可能會(huì )干擾用于肽研究的生物系統 
      C。滴加 DMF 或 DMSO(最多 30%)直至肽溶解。 
      d.在反相色譜中,DMF 將與緩沖液前沿一起洗脫。峰值可能會(huì )很高,具體取決于注射量。大多數肽的保留時(shí)間比大的 DMF 峰洗脫所需的幾分鐘要長(cháng)。如果肽非常小并且洗脫較早,則注射肽時(shí)可能必須降低起始百分比。  

      凍干肽的儲存  

      所有肽均應冷藏保存,最好在 -20 ℃ 下保存,以獲得最大穩定性。大多數肽在 -20 ℃ 以下儲存時(shí)將保持穩定數月。這適用于許多氨基酸衍生物、脂質(zhì)、酶和其他蛋白質(zhì)以及肽。例外是固定化蛋白質(zhì)和肽。 
      使用冷藏產(chǎn)品時(shí),應將瓶子或小瓶加熱至室溫。打開(kāi)前放入裝有新鮮干燥劑的干燥器中。從 -20 ℃ 起,這可能需要一個(gè)小時(shí)或更長(cháng)時(shí)間,具體取決于包裝尺寸。如果不這樣做,打開(kāi)瓶子或小瓶時(shí)可能會(huì )導致產(chǎn)品上形成冷凝,并會(huì )大大降低材料的穩定性。打開(kāi)后,應稱(chēng)出所需數量以防止吸水。對于某些吸濕性肽來(lái)說(shuō),這是一個(gè)特殊的問(wèn)題。  

      溶液中肽的儲存  

      溶液中的肽比凍干肽穩定性差得多。為了獲得最佳結果,請遵循以下準則。 
      1. 避免反復解凍和冷凍。建議將儲備溶液等分。只解凍需要的部分。請勿儲存稀釋溶液。
      2.  為了獲得最大的穩定性,請在 -20 ℃ 下儲存在無(wú)菌、pH 5 至 7 的緩沖溶液中。
      3.  半胱氨酸、蛋氨酸或色氨酸等氨基酸容易氧化,應溶解或保存在無(wú)氧水中。

      4. 細菌污染會(huì )降解肽,因此請使用無(wú)菌水或緩沖液。 

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