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      你知道細胞破碎有幾種方式嗎

      更新時(shí)間:2022-07-25      點(diǎn)擊次數:1704
        細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來(lái)的技術(shù),是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎。結合重組DNA技術(shù)和組織培養技術(shù)上的重大進(jìn)展,以前認為很難獲得的蛋白質(zhì)現在可以大規模生產(chǎn)。
        但是由于細菌、酵母、真菌、植物細胞壁的組成成分不同,且同類(lèi)細胞結成的網(wǎng)狀結構也不同,所以其細胞壁的堅固程度不同。而動(dòng)物細胞雖沒(méi)有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來(lái)破膜,達到提取產(chǎn)物的目的。
        在目前的細胞破碎方法中主要使用的儀器種類(lèi)包括:
        1. 高剪切均質(zhì)乳化破碎細胞
        方法:高剪切均質(zhì)機主要是由于了轉子高速運轉所產(chǎn)生的高速線(xiàn)速度,還有頻率高的機械的效應,伴隨著(zhù)強勁的動(dòng)能,讓組織或細胞可以在定子、轉子之間非常狹窄的空隙之中受到了非常的強烈的機械還有液力的剪切、液層的摩擦、離心的擠壓、撞擊的撕裂還有湍流等多種綜合性的效果,造成細胞破碎。
        2. 組織搗碎機破碎細胞
        方法:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約 1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開(kāi)動(dòng)開(kāi)關(guān)后, 逐步加速至所需速度。
        3. 超聲波破碎細胞
        方法:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂,超聲對細胞的作用主要有熱效應,空化效應和機械效應。
        說(shuō)明:處理少量樣本,操作簡(jiǎn)單,重復性較好,節省時(shí)間;多用于微生物和組織細胞的破碎,如用大腸桿菌制備各種酶。因為超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團能使某些敏感性活性物質(zhì)變性失活;大容量裝置聲能傳遞,散熱均有困難,應采取相應降溫措施;對超聲波敏感和核酸應慎用。
        4. 組織勻漿器破碎細胞
        方法:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來(lái)回研磨,上下移動(dòng),即可將細胞研碎。勻漿器的研缽磨球和玻璃管內壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離。
        說(shuō)明:此法細胞破碎程度高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。較易造成堵塞的團狀或絲狀真菌,較小的革蘭氏陽(yáng)性菌以及有些亞細胞器,質(zhì)地堅硬,易損傷勻漿閥者,不適合用該法處理。
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